每種物質(zhì)就有固定的吸收光譜曲線(xiàn),可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是紫外可見(jiàn)分光光度計原理定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結構和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
以下是紫外可見(jiàn)分光光度計的原理和基本操作步驟:
原理:
1.根據比爾定律,溶液中物質(zhì)的吸光度與其濃度成正比,可用來(lái)定量分析。
2.光通過(guò)樣品時(shí),被樣品吸收的光強度與入射光強度之比即為吸光度。
操作步驟:
1.打開(kāi)電源,并預熱一段時(shí)間以穩定儀器性能。
2.調節波長(cháng)選擇旋鈕,選擇所需的測試波長(cháng)(紫外或可見(jiàn)光范圍)。
3.使用空白試劑(溶劑)校準儀器,將空白試劑置于樣品室中,調零吸光度。
4.取待測溶液樣品,將其置于樣品室中,關(guān)閉樣品室,記錄吸光度讀數。
5.如果需要測定多個(gè)波長(cháng)下的吸光度,依次調節波長(cháng)選擇旋鈕進(jìn)行測量。
6.根據實(shí)驗需要,可以繪制吸光度與波長(cháng)的曲線(xiàn),進(jìn)行定量或定性分析。
7.測量結束后,清潔樣品室和光學(xué)元件,關(guān)閉儀器并保存數據。
注意:在操作紫外可見(jiàn)分光光度計時(shí),應注意避免樣品污染、保持儀器清潔,并按照儀器說(shuō)明書(shū)和操作手冊進(jìn)行操作。